8th Cuban Congress on Microbiology and Parasitology, 5th National Congress on Tropical Medicine and 5th International Symposium on HIV/aids infection in Cuba

Title

ESTANDARIZACIÓN DE UN PROTOCOLO DE SUBTIPIFICACIÓN MOLECULAR MEDIANTE ELECTROFORESIS DE CAPOS PULSADOS EN MINIGELES PARA EL ESTUDIO DE PASTEURELLA MULTOCIDA.

Authors

Nicot Yainelis Garrido

Abstract


Pasteurella multocida es un cocobacilo gram-negativo, agente etiológico causante de enfermedades a los animales de cría intensiva, entre las que se describen rinitis atrófica porcina y septicemia hemorrágica. El objetivo de este estudio fue estandarizar un protocolo de subtipificación molecular mediante Electroforesis de Campos Pulsados en minigeles.

Se estudiaron tres cepas de P. multocida (PMI, PMII y PMIII), aislados de infecciones respiratorias sistémicas en cerdos, previamente identificadas en los laboratorios de microbiología del grupo empresarial LABIOFAM en La Habana, Cuba. Los minibloques de agarosa fueron preparados según los métodos enzimático y no enzimático, se probaron tres tiempos diferentes de tratamientos (2, 4 y 16 horas); fueron digeridos con 5 y 10 U de las endonucleasas de restricción ApaI y NotI por 2, 4 y 16 h y los pulsotipos fueron obtenidos en minicámaras CHEF y TAFE (Guefast 06). Las imágenes de los patrones de bandas de ADN se procesaron en el programa GuefastScan y el procesamiento estadístico en Statistica 8.0. Las variantes de tratamiento rindieron patrones de bandas de ADN similares para las tres cepas de P. multocida analizadas. Las cepas PMI y PMIII son indistinguibles entre ellas y se clasifican en un subtipo diferente al de la cepa PMII dentro del mismo tipo. De manera que PMI y PMIII se clasifican en el Tipo A subtipo A1, mientras que PMII pertenece al mismo Tipo A y subtipo A2.